Browsing by Author "Valdivia Román, Andrés Felipe"
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- ItemFact or Fiction, It Is Time for a Verdict on Vasculogenic Mimicry?(2019) Valdivia Román, Andrés Felipe; Mingo Orsini, Gabriel Antonio; Aldana, Varina; Pinto, Mauricio P.; Ramírez, Marco; Retamal, Claudio; González, Alfonso; Nualart, Francisco; Corválan, Alejandro H.; Owen, Gareth Ivor
- ItemMímica vasculogénica presenta una arquitectura interna diferente de vasos sanguíneos y requiere de la señalización de la matriz extracelular para su formación.(2019) Valdivia Román, Andrés Felipe; Owen, Gareth Ivor; Pontificia Universidad Católica de Chile. Facultad de Ciencias BiológicasLa presencia de una vía de perfusión en ausencia de células endoteliales, conocida como mímica vasculogénica (VM), se correlaciona fuertemente con una baja sobrevida de pacientes. Se ha reportado que la VM no puede ocurrir en ausencia de matriz extracelular (ECM), sin embargo, los mecanismos por los cuales las células tumorales pueden crear estas estructuras en ausencia de células endoteliales siguen siendo desconocidos. Actualmente no existe ningún modelo in vitro estandarizado para el estudio de VM, y la mayoría de las publicaciones en la literatura reportan estructuras que no corresponden a VM. En esta tesis, utilizando un modelo in vitro estandarizado, buscamos comprender y diferenciar el proceso de VM de angiogénesis y estudiar si la señalización a través de la ECM es esencial para el proceso de iniciación de VM. Utilizamos microscopía confocal y reconstrucción con IMARIS / ZEN 2012 para demostrar que las células cancerígenas pueden crear una red tubular en líneas celulares de cáncer y cultivos primarios de cáncer de ovario y gastico. El uso de Matrigel y matrices 3D que contenían proteínas únicas, permitieron descifrar las proteínas de la matriz extracelular involucradas en la formación de VM. Las vías intercelulares se resolvieron utilizando inhibidores químicos. Nuestros resultados indican que VM solo ocurre cuando las células se cultivan en cultivo 3D y solo el 23% de los cultivos primarios de cáncer son capaces de realizar este proceso. La presencia de laminina 1 es suficiente para desencadenar la formación de estructuras tubulares y esto puede implicar que la señalización por integrinas, así como las metaloproteasas (MMP) pueden tener un rol fundamental. Las vías de señalización de FAK y PI3K/AKT son necesarias para formar estructuras tubulares funcionales. En resumen, demostramos que VM posee una estructura diferente a los vasos sanguíneos de angiogénesis. Laminina 1, un componente de la ECM, puede promover el proceso de VM, el cual además involucra la señalización de objetivos potenciales de la ruta PI3K. Como la VM se asocia con una reducción en la supervivencia del paciente, el esclarecimiento de los mecanismos de formación puede brindar nuevas terapias contra el cáncer.La presencia de una vía de perfusión en ausencia de células endoteliales, conocida como mímica vasculogénica (VM), se correlaciona fuertemente con una baja sobrevida de pacientes. Se ha reportado que la VM no puede ocurrir en ausencia de matriz extracelular (ECM), sin embargo, los mecanismos por los cuales las células tumorales pueden crear estas estructuras en ausencia de células endoteliales siguen siendo desconocidos. Actualmente no existe ningún modelo in vitro estandarizado para el estudio de VM, y la mayoría de las publicaciones en la literatura reportan estructuras que no corresponden a VM. En esta tesis, utilizando un modelo in vitro estandarizado, buscamos comprender y diferenciar el proceso de VM de angiogénesis y estudiar si la señalización a través de la ECM es esencial para el proceso de iniciación de VM. Utilizamos microscopía confocal y reconstrucción con IMARIS / ZEN 2012 para demostrar que las células cancerígenas pueden crear una red tubular en líneas celulares de cáncer y cultivos primarios de cáncer de ovario y gastico. El uso de Matrigel y matrices 3D que contenían proteínas únicas, permitieron descifrar las proteínas de la matriz extracelular involucradas en la formación de VM. Las vías intercelulares se resolvieron utilizando inhibidores químicos. Nuestros resultados indican que VM solo ocurre cuando las células se cultivan en cultivo 3D y solo el 23% de los cultivos primarios de cáncer son capaces de realizar este proceso. La presencia de laminina 1 es suficiente para desencadenar la formación de estructuras tubulares y esto puede implicar que la señalización por integrinas, así como las metaloproteasas (MMP) pueden tener un rol fundamental. Las vías de señalización de FAK y PI3K/AKT son necesarias para formar estructuras tubulares funcionales. En resumen, demostramos que VM posee una estructura diferente a los vasos sanguíneos de angiogénesis. Laminina 1, un componente de la ECM, puede promover el proceso de VM, el cual además involucra la señalización de objetivos potenciales de la ruta PI3K. Como la VM se asocia con una reducción en la supervivencia del paciente, el esclarecimiento de los mecanismos de formación puede brindar nuevas terapias contra el cáncer.
- ItemPlatelets enhance tissue factor protein and metastasis initiating cell markers, and act as chemoattractants increasing the migration of ovarian cancer cells.(2015) Orellana, Renan.; Kato Cardemil, Sumie Rode; Erices, Rafaela.; Bravo Castillo, María Loreto; González Hevia, Pamela Andrea.; Oliva, Bárbara.; Cubillos Alfaro, Sofía María Jesús.; Valdivia Román, Andrés Felipe; Brañes, Jorge; Cuello F., Mauricio; Ibañez, Carolina; Barriga Cosmelli, María Isabel; Bravo, Erasmo.; Alonso, Catalina.; Bustamente, Eva.; Castellon, Enrique.; Hidalgo, Patricia.; Trigo, Cesar.; Panes Becerra, Olga Teresa; Pereira Garcés, Jaime Ignacio; Mezzano, Diego; Owen, Gareth IvorAbstract Background An increase in circulating platelets, or thrombocytosis, is recognized as an independent risk factor of bad prognosis and metastasis in patients with ovarian cancer; however the complex role of platelets in tumor progression has not been fully elucidated. Platelet activation has been associated with an epithelial to mesenchymal transition (EMT), while Tissue Factor (TF) protein expression by cancer cells has been shown to correlate with hypercoagulable state and metastasis. The aim of this work was to determine the effect of platelet-cancer cell interaction on TF and “Metastasis Initiating Cell (MIC)” marker levels and migration in ovarian cancer cell lines and cancer cells isolated from the ascetic fluid of ovarian cancer patients. Methods With informed patient consent, ascitic fluid isolated ovarian cancer cells, cell lines and ovarian cancer spheres were co-cultivated with human platelets. TF, EMT and stem cell marker levels were determined by Western blotting, flow cytometry and RT-PCR. Cancer cell migration was determined by Boyden chambers and the scratch assay. Results The co-culture of patient-derived ovarian cancer cells with platelets causes: 1) a phenotypic change in cancer cells, 2) chemoattraction and cancer cell migration, 3) induced MIC markers (EMT/stemness), 3) increased sphere formation and 4) increased TF protein levels and activity. Conclusions We present the first evidence that platelets act as chemoattractants to cancer cells. Furthermore, platelets promote the formation of ovarian cancer spheres that express MIC markers and the metastatic protein TF. Our results suggest that platelet-cancer cell interaction plays a role in the formation of metastatic foci.