Open platform for the implementation of RNA sensing reactions in cell-free systems

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2021
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La biología sintética busca el desarrollo de funciones programables y predecibles en sistemas biológicos. Uno de los recientes avances en esta área son los toehold swtiches: reguladores de la expresión genética diseñados denovo y que permiten la traducción de un gen de forma gatillada por la interacción con un RNA trigger" de secuencia especifica. Por otro lado, los sistemas de expresión genética libre de células (cell-free) han sido utilizados durante décadas en el campo de la biología molecular y fueron claves en el descubrimiento del código genético. Sin embargo, solo muy recientemente han empezado a utilizarse como una herramienta para la bioingeniería. La expresión de toehold swtiches en sistemas de libre de células generó una plataforma de diagnóstico muy promisoria ya que los sensores de RNA tipo toehold pueden ser liofilizados para su transporte a temperatura ambiente con el objetivo de ser utilizadas en terreno y en zonas remotas. No obstante, a la fecha, estos sensores solamente han sido implementados en sistemas de expresión genética reconstituidos, del tipo PURE (por sus siglas en inglés: Protein expression Using Reconstituted Elements). Los sistemas PURE requieren transporte en fr´ıo (-80 C) desde los proveedores en el hemisferio norte, y son prohibitivamente caros para los usuarios en América Latina.
Description
Tesis (Doctor in Biological Sciences with mention in Molecular Genetics and Microbiology)--Pontificia Universidad Católica de Chile, 2021
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